差速貼壁法基于成纖維細胞與雜細胞貼壁速度的差異進行分離。成纖維細胞貼壁較快，在接種后短時間內(nèi)即可附著于培養(yǎng)瓶壁，而上皮細胞等雜細胞貼壁較慢。因此，將細胞懸液接種至培養(yǎng)瓶中靜置培養(yǎng)一段時間（如20-30分鐘）后，成纖維細胞已貼壁，而雜細胞仍懸浮于培養(yǎng)液中。此時，吸去上清液，更換新鮮培養(yǎng)基，即可獲得較純的成纖維細胞。

　　酶解梯度優(yōu)化則通過調(diào)整消化酶的種類和濃度，選擇性消化雜細胞。例如，使用膠原酶和胰酶聯(lián)合消化時，可適當增加膠原酶的比例或延長消化時間，以更地去除上皮細胞等對膠原酶敏感的細胞。同時，通過梯度消化，即分階段收集消化液，可進一步減少成纖維細胞的損失。

　　專用培養(yǎng)基篩選是利用成纖維細胞與雜細胞對培養(yǎng)基成分的不同需求進行分離。一些專用原代成纖維細胞培養(yǎng)基中添加了特定的生長因子和抑制劑，可促進成纖維細胞的生長，同時抑制雜細胞的增殖。

　　免疫磁珠分選則是一種更為精確的純化方法。通過利用成纖維細胞表面特異性標志物（如波形蛋白、纖維連接蛋白等）的抗體，將磁珠與抗體結(jié)合后，再與細胞懸液孵育，即可通過磁力作用將成纖維細胞從雜細胞中分離出來。