pShuttle-CMV-N-Myc含有CMV啟動子可以高效啟動目的蛋白在細(xì)胞中的表達(dá)；在多克隆位點(diǎn)的5'端含有一個可以編碼Myc標(biāo)簽的序列，因此可以表達(dá)出含有Myc標(biāo)簽的融合蛋白，可以方便地使用抗Myc的抗體來識別目的蛋白，有利于目的蛋白檢測和分離純化。

本質(zhì)粒為卡那霉素抗性。

重組腺病毒(Recombinant adenoviruses)是一種常見的用于在培養(yǎng)細(xì)胞或動物體內(nèi)表達(dá)外源基因的重要工具。重組腺病毒具有感染宿主細(xì)胞范圍廣、感染不依賴細(xì)胞分裂、高滴度及目的基因表達(dá)水平高等特性。常用的腺病毒載體是人類血清5型腺病毒。改造后的人類血清5型腺病毒，刪除了在病毒裝配過程中起關(guān)鍵作用的E1基因和非必須的能表達(dá)逃避宿主免疫的E3基因，E1和E3基因的刪除使得重組腺病毒不能自我復(fù)制，同時給外源基因的插入提供了空間，最長可插入7.5kb的外源基因。從而提高了重組腺病毒的的安全性和可操作性。再利用攜帶E1基因的AD-293、293A、HEK293等細(xì)胞作為包裝細(xì)胞就可以完成重組腺病毒的包裝。

pShuttle系列的穿梭質(zhì)粒攜帶外源目的基因，經(jīng)過Pme I線性化，隨后與腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1(8106)共轉(zhuǎn)染到大腸桿菌BJ5183中，或者轉(zhuǎn)染到已經(jīng)已經(jīng)預(yù)轉(zhuǎn)染了pAdEasy-1質(zhì)粒的BJ5183菌株(8107)中同源重組。BJ5183菌株表達(dá)recET基因，具有很高的基因同源重組(homologous recombination)活性，使帶有目的基因的穿梭質(zhì)粒與腺病毒骨架質(zhì)粒pAdEasy-1通過末端反向重復(fù)序列同源重組，實(shí)現(xiàn)外源基因與腺病毒基因組的整合。將重組的攜帶外源基因的腺病毒質(zhì)粒用Pac I線性化后轉(zhuǎn)染到AD-293、293A、HEK293等重組腺病毒包裝細(xì)胞中進(jìn)行包裝。從而制備獲得高滴度、自我復(fù)制缺陷并且?guī)в心康幕虻闹亟M腺病毒。

目的基因引入時不能含有Pme I及Pac I這兩個酶切位點(diǎn)，如果含有該兩個酶切位點(diǎn)的目的基因，需要對該位點(diǎn)進(jìn)行突變方可進(jìn)行基因操作。

pShuttle-CMV-N-Myc質(zhì)粒的主要信息如下：

pShuttle-CMV-N-Myc質(zhì)粒的圖譜如下：

pShuttle-CMV-N-Myc的多克隆位點(diǎn)的的詳細(xì)圖譜見說明書

pShuttle-CMV-N-Myc中沒有的酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that do not cut pShuttle-CMV-N-Myc)包括：

pShuttle-CMV-N-Myc中的單酶切位點(diǎn)(Restriction enzymes that cut pShuttle-CMV-N-Myc)包括：

pShuttle-CMV-N-Myc質(zhì)粒中推薦使用的測序引物序列如下：

forward primer (888-907): 5′GGTCTATATAAGCAGAGCTG3′

Reverse primer (1048-1070): 5′GTGGTATGGCTGATTATGATCAG3′

pShuttle-CMV-N-Myc的全序列信息:pShuttle-CMV-N-Myc.txt。

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本質(zhì)粒未經(jīng)書面許可不得用于任何商業(yè)用途，也不得移交給訂貨人所在實(shí)驗(yàn)室外的任何個人或單位。

本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。