輔酶Q₁₀(CoQ₁₀)檢測試劑盒(比色法)

一、產(chǎn)品簡介：

輔酶Q(CoenzymeQ，CoQ)是一種生物體內(nèi)廣泛存在的脂溶性醌類化合物，故又稱泛醌，在體內(nèi)呼吸鏈中質(zhì)子移位及電子傳遞中起重要作用，是呼吸鏈中重要的遞氫體，它是細(xì)胞呼吸和細(xì)胞代謝的激活劑，也是重要的抗氧化劑和非特異性免疫增強(qiáng)劑。對(duì)多種酶有激活作用。不同生物體來源的輔酶Q其側(cè)鏈異戊烯單位的數(shù)目不同，人類和哺乳動(dòng)物是10個(gè)異戊烯單位，故稱輔酶Q₁₀。輔酶Q₁₀是輔酶Q類的重要成員之一，它們與線粒體內(nèi)膜相結(jié)合，廣泛參與體內(nèi)的生物代謝過程。輔酶Q₁₀不僅能給心臟提供動(dòng)力，還具的抗氧化，清除自由基功能，能預(yù)防血管壁脂質(zhì)過氧化，預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化，并且無任何毒副作用。具體作用體現(xiàn)在以下四個(gè)方面：

①幫助保護(hù)心臟輔酶Q₁₀有助于為心肌提供充足氧氣，預(yù)防突發(fā)性心臟病，尤其在心肌缺氧過程中輔酶Q₁₀發(fā)揮關(guān)鍵性改善作用。

②保護(hù)皮膚長期使用輔酶Q₁₀能夠有效防止皮膚衰老，減少臉部皺紋。

③抗疲勞輔酶Q₁₀使細(xì)胞保持良好健康的狀態(tài)，因而機(jī)體充滿活力，精力旺盛，腦力充沛。它是細(xì)胞自身產(chǎn)生的天然抗氧化劑和細(xì)胞代謝啟動(dòng)劑，具有保護(hù)和恢復(fù)生物膜結(jié)構(gòu)的完整性、穩(wěn)定膜電位作用，是機(jī)體的非特異性免疫增強(qiáng)劑，因此顯示出抗疲勞作用。

④防癌抗癌研究表明，輔酶Q₁₀有抗腫瘤作用，臨床對(duì)于晚期轉(zhuǎn)移性癌癥有一定療效。

雅吉生物輔酶Q₁₀(CoQ₁₀)檢測試劑盒(比色法)其檢測原理是待測樣品在堿性條件下，EC取代了CoQ₁₀上的甲氰基，形成藍(lán)色化合物，通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測定620nm處吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可測出輔酶Q₁₀的含量。本產(chǎn)品可用于測定花生、牛肉、沙丁魚、保健品等食品中的CoQ₁₀的含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

二、產(chǎn)品組成：

三、自備材料：

1、無水乙醇

2、比色杯或96孔板

3、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀

四、操作步驟(僅供參考)：

1、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：用EC buffer稀釋CoQ₁₀標(biāo)準(zhǔn)(5mg/ml)至0.5mg/ml，

-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>

2、準(zhǔn)備樣品：取新鮮動(dòng)物心臟或肝臟等樣品，采用醇?jí)A皂化法、溶劑皂化法等提取適量的CoQ₁₀提取液，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>

3、CoQ₁₀加樣：按照下表設(shè)置空白、標(biāo)準(zhǔn)和測定，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的CoQ₁₀濃度過高，可適當(dāng)減少樣品用量或用EC buffer稀釋后再進(jìn)行測定。

計(jì)算：

液體樣品輔酶Q10濃度：CoQ10(mg/ml)=A_測定/A_{標(biāo)準(zhǔn)}×0.5

液體樣品輔酶Q10含量：CoQ10(mg)=A_測定/A_{標(biāo)準(zhǔn)}×0.5×V_T

每100g固體樣品輔酶Q10含量：CoQ10(mg/g)=A_測定/A_{標(biāo)準(zhǔn)}×0.5×V_T×100/m

式中：A_測定=測定管的吸光度

A_{標(biāo)準(zhǔn)}=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度

0.5=CoQ₁₀標(biāo)準(zhǔn)的濃度(mg/ml)

V_T=CoQ₁₀提取液的總體積(ml)

m=樣品的實(shí)際用量(g)

注意事項(xiàng)：

1、待測樣品中不能含有CoQ₁₀抑制劑，同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

2、在皂化過程中，震蕩不要?jiǎng)×?，以免形成乳化層?/span>

3、CoQ₁₀ Assay buffer 如果出現(xiàn)渾濁或絮狀物，應(yīng)棄用。

4、CoQ₁₀標(biāo)準(zhǔn)梯度應(yīng)準(zhǔn)確，盡量減少不必要的誤差。

5、EC solution有一定毒性，請(qǐng)小心操作。

6、檢測標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，按步驟3表格混合后，2min內(nèi)即出現(xiàn)明顯的藍(lán)色變化并逐漸加深，20min后藍(lán)色開始變淺，30min 后逐漸呈黃綠色。620nm檢測數(shù)據(jù)表明，隨著時(shí)間的延長，OD值在不斷的下降，對(duì)應(yīng)的顏色也已發(fā)生變化，特別是高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品變化比較大。因此，應(yīng)在出現(xiàn)最深的藍(lán)色結(jié)果且穩(wěn)定的時(shí)間段內(nèi)盡快檢測，而且建議每次同時(shí)檢測標(biāo)準(zhǔn)品(0.3~0.5mg/ml)和樣品。如有條件，最好用酶標(biāo)儀檢測，減少因檢測時(shí)間導(dǎo)致的誤差。

7、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6 個(gè)月有效。